Ссылка не будет отображаться активной, чтобы щелкнуть при наведении курсора

Строки в python неизменяемы, поэтому вы не можете рассматривать их как список и присваивать индексы.

Вместо этого используйте .replace() :

line = line.replace(';', ':')

Если вам нужно заменить только определенные точки с запятой, вам нужно быть более конкретным. Вы можете использовать срез, чтобы изолировать секцию строки, которую нужно заменить:

line = line[:10].replace(';', ':') + line[10:]

Это заменит все полуколоны в первых 10 символах строки.